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        電泳遷移率檢測是轉錄因子研究的經典方法

        發布時間:2021-06-27   點擊次數:895次
          帶電粒子在單位時間內移動的距離稱為電泳遷移率。凝膠遷移或電泳遷移率檢測(ElectrophoreticMobilityShiftAssay,EMSA)是一種檢測蛋白質和DNA序列相互結合的技術,可用于定性和定量分析;目前已用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是轉錄因子研究的經典方法。
          凝膠遷移實驗又稱凝膠阻滯實驗或電泳遷移率實驗(EMSA,electrophoreticmobilityshiftassay),是目前研究核酸與蛋白質相互作用的一種重要實驗手段,常用于轉錄因子與啟動子相互作用的驗證性實驗。該實驗利用核酸與蛋白結合后,在非變性聚丙烯酰氨凝膠中電泳的遷移速率會明顯降低的原理,通過設計特異性和非特異性的探針,通過孵育與目標蛋白結合,形成探針-蛋白復合體,由于分子量變大,在聚丙烯酰氨凝膠中的電泳遷移速率下降,相比于未結合的探針會出現滯后效應,再通過探針上特殊的標記物性質,通過轉膜、顯色或曝光,探針-蛋白復合體所在的位置便能形成條帶,從而證明核酸與蛋白的相互作用。目前隨著實驗技術的改進,能夠定性和定量的完成實驗。
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